| 更新時(shí)間： | 2025-01-01 |
| 型 號(hào)： | |
| 所屬分類： | 芯片定制及檢測(cè)實(shí)驗(yàn) |
| 報(bào) 價(jià)： | 1000 |
提供商: 上海研謹(jǐn)生物服務(wù)名稱: 環(huán)狀RNA芯片定制檢測(cè)服務(wù)規(guī)格: 實(shí)驗(yàn)服務(wù)價(jià)格： 1000元收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果:歡迎咨詢?cè)斦劊覀儠?huì)根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。更多實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)請(qǐng)瀏覽網(wǎng)站其他內(nèi)容,或來電詳詢!
環(huán)狀RNA芯片定制檢測(cè)服務(wù)
實(shí)驗(yàn)技術(shù)簡(jiǎn)介: 環(huán)狀RNA (ircRNA) 是區(qū)別于傳統(tǒng)線性RNA的一類新型RNA,具有閉合環(huán)狀結(jié)構(gòu),大量存在于真核轉(zhuǎn)錄組中。大部分的環(huán)狀RNA是由外顯子序列構(gòu)成，在不同的物種中具有保守性,同時(shí)存在組織及不同發(fā)育階段的表達(dá)特異性。由于環(huán)狀RNA對(duì)核酸酶不敏感，所以比線性RNA更為穩(wěn)定， 這使得環(huán)狀RNA在作為新型診斷標(biāo)記物的開發(fā)應(yīng)用上具有明顯優(yōu)勢(shì)。近來研究顯示，環(huán)狀RNA在不同物種中起到miRNA海綿的作用,稱之為競(jìng)爭(zhēng)性內(nèi)源RNA (ceRNA) ， 能競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合miRNA。而與疾病關(guān)聯(lián)性miRNA的相互作用說明環(huán)狀RNA對(duì)疾病的調(diào)控起著非常重要的作用。
實(shí)驗(yàn)操作流程:
1、樣品RNA抽提
2、RNA質(zhì)量檢測(cè)
①使用Nanodrop測(cè)定RNA在分光光度計(jì)260nm、280nm和230nm的吸收值，以計(jì)算濃度并評(píng)估純度。
②用甲醛電泳試劑進(jìn)行變性瓊脂糖凝膠電泳，檢測(cè)RNA純度及完整性。
③提供RNA QC報(bào)告。
3、RNase R處理
4、cDNA/aRNA樣品合成和標(biāo)記
5、標(biāo)記效率質(zhì)量檢測(cè)使用Nanodrop檢測(cè)熒光標(biāo)記效率，標(biāo)記效率合格以保證后續(xù)芯片實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。
6、芯片雜交
在標(biāo)準(zhǔn)條件下將標(biāo)記好的探針和高密度基因組芯片進(jìn)行雜交。
7、圖像采集和數(shù)據(jù)分析
使用GenePix 4000B芯月掃描儀掃描芯片的熒光強(qiáng)度,并將實(shí)驗(yàn)結(jié)果轉(zhuǎn)換成數(shù)字型數(shù)據(jù)保存，使用配套軟件對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行分析運(yùn)算。
8、提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告
①Scanning Image: Cy3熒光掃描圖像;
②Scatter Plot:散點(diǎn)圖，X軸為Control信號(hào)值，Y軸為Experiment信號(hào)值， 表示信號(hào)數(shù)據(jù)總體分布趨勢(shì);
③Raw Data:探針的掃描熒光信號(hào)強(qiáng)度原始數(shù)據(jù);
④Normalized Data:經(jīng)過統(tǒng)計(jì)學(xué)方法標(biāo)準(zhǔn)化后數(shù)值;
⑤P-value: T-test統(tǒng)計(jì)分析顯著差異表達(dá)的基因，p-value越小， 該circRNA在兩組樣本間差異表達(dá)越顯著
⑥significant Up & Down Regulated CircRNA List:顯著差異表達(dá)的circRNA列表包含F(xiàn)old Change, p-valuel以及circRNA的詳細(xì)注釋信息(相應(yīng)的線性mRNA和miRNA結(jié)合位點(diǎn))。
客戶提供:
1、實(shí)驗(yàn)對(duì)象為組織樣品，取適量(50-100mg) 新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品，使用
BioPulverizer TM冰凍粉碎組織，加1m的RNA抽提試劑TRIzol (Invitrogen) ，使用Mini-Bead-Beater-16勻漿后抽提RNA。
2、實(shí)驗(yàn)對(duì)象為細(xì)胞樣品，每份樣品取1x106~ 1x107細(xì)胞，加1m的RNA抽提試劑TRIzol (樣品為貼壁細(xì)胞，每10cm2培養(yǎng)皿TRIzo1使用量為1ml)，裂解后抽提RNA。
交付標(biāo)準(zhǔn):
1、芯片檢測(cè)數(shù)據(jù)
2、完整的實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(含軟件分析結(jié)果)以及實(shí)驗(yàn)材料
實(shí)驗(yàn)代做服務(wù)：
ELISA試劑盒免費(fèi)代檢測(cè) | CCK8檢測(cè) | 基因組DNA提取
| 蛋白相互作用分析 |
Western Blot
| 免疫組化 | 熒光定量PCR | 動(dòng)物模型服務(wù) |
流式細(xì)胞檢測(cè) | 細(xì)胞增殖 | 激光共聚焦 | DNA甲基化實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞劃痕 | 鈣離子濃度檢測(cè) | 掃描電鏡實(shí)驗(yàn) | microRNA 測(cè)序 |
動(dòng)物實(shí)驗(yàn) | Taqman探針 | ATP/ADP檢測(cè)
| 石蠟/冰凍切片 |
定點(diǎn)突變 | 線粒體膜電位(MMP)檢測(cè) | 細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的測(cè)定 | 藥理毒理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
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免疫共沉淀 | 真核表達(dá)載體構(gòu)建 | 染色質(zhì)免疫沉淀CHIP | 非標(biāo)定量（Label-free）實(shí)驗(yàn) |
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